引言

　　假期就要到了，是不是想要好好放松一下呢？但别忘了，我们的实验室小伙伴也需要一个“假期”哦！

　　色谱柱是液相色谱中的核心部件，就像人的心脏一样重要。它的“心脏”就是固定相，固定相的作用是吸附样品中的组分，使它们得以分离。因此，保持色谱柱的清洁对于实验结果至关重要。今天就让我们一起给色谱柱“洗个澡”，让它焕然一新吧。

SEC色谱柱

　　保存方法

　　日常使用中，赛分科技 SEC色谱柱建议保存在150 mM磷酸钠缓冲液中(pH 7.0)。如长期不用时，则需将色谱柱保存在含0.02% NaN3的150 mM磷酸盐缓冲液(pH 7.0)或20%乙醇中，以防止菌体污染。

　　清洗、再生方法

　　多次使用后某些样品可能会吸附到入口筛板或填料上，当积累至一定程度时会出现压力升高并伴随峰型展宽的现象，此时需要清洗色谱柱。

　　一般流程为：断开检测器，反接色谱柱，在低于50%最大推荐流速下用清洗液冲洗10-15倍柱体积。

　　推荐清洗溶液有：

　　1 0.5 M硫酸钠溶液(pH 3.0)：适用于碱性蛋白吸附后的清洗；

　　2 10%-20%有机溶剂（乙醇、异丙醇、乙腈）：疏水性蛋白吸附后的清洗；

　　3 以上清洗方法无效时，可使用4 M尿素(pH 7.0)：适用于易聚集蛋白样品的清洗。

IEX色谱柱

　　保存方法

　　长期不用时，请将Proteomix SAX和WAX柱保存在含0.1%NaN3的20 mM Tris缓冲液(pH 8.0)中。Proteomix SCX 和WCX柱保存在含 0.1%NaN3的20 mM磷酸盐缓冲液(pH 6.0)中。色谱柱需要用储存缓冲溶液冲洗至少15倍柱体积。然后再用随色谱柱附上的两个可拆卸的堵头塞紧色谱柱的两端以防止柱床的干涸。

　　过年期间，Proteomix阴离子交换色谱柱短期保存在20 mM Tris，(pH 8.0)中。阳离子交换柱保存在20 mM磷酸盐缓冲液，(pH 6.0) 中。

　　清洗方法

　　如果预柱滤片或保护柱在分离之前曾经使用过，需要首先将预柱滤片或保护柱反接用清洗溶液冲洗15-30min。如果经过冲洗效果没有得到明显改善，则需要更换预柱滤片或保护柱。

　　在使用过程中，样品经常会被吸附在柱入口端的筛板或者填料上。当样品吸附累积到一定程度时，柱压将会升高，色谱峰形也会出现展宽。这时就需要清洗色谱柱了。

　　一般流程为：断开检测器，反接色谱柱，在低于50%最大推荐流速下用清洗液冲洗10-15倍柱体积。

　　推荐清洗溶液有：

　　1对于一般亲水性较好的蛋白样品，建议采用 1 M NaCl 溶液清洗 10 倍柱体积。

　　2对疏水性较强的蛋白样品，建议采用 20%乙醇清洗 10 倍柱体积 。

　　3对于Proteomix阴离子交换色谱柱，清洗溶液为含150 mM硝酸钾的75%乙腈溶液（用HCl调节pH至2）。

　　4对于Proteomix阳离子交换色谱柱，清洗溶液为含1.0 M NaCl的 50 mM磷酸盐缓冲液(pH 10)。

　　再生方法

　　1 对于阴离子色谱柱(WAX、SAX)，建议采用0.1 M的硫酸溶液清洗10 倍柱体积，然后保存到 20 mM Tris(pH 8.0 )中。

　　2 对于阳离子色谱柱(SCX、WCX)，建议采用0.1 M的硫酸溶液或20 mM NaOH清洗 10倍柱体积,然后保存到20 mM磷酸盐缓冲液(pH 6.0)中。

　　怎么样？是不是觉得给色谱柱“洗澡”也不是一件简单的事情呢？不过，只要我们用心呵护，它一定会回报我们清晰的色谱峰！假期愉快哦！