其他多肽样品分析应用案例
多肽与短肽均为氨基酸通过肽键连接形成的化合物,但在结构与特性上存在显著差异:多肽通常由10-100个氨基酸组成,分子量低于10,000 Da;短肽(亦称小肽或寡肽)则由2-10个氨基酸构成,分子量范围为180-500 Da,可直接被人体细胞吸收。凭借生物活性高、特异性强及毒性反应较弱等优势,多肽在生物医药等领域应用广泛。为助力多肽药物关键质量属性的精准评估,文中对其他多肽药物分析中常用的HPLC方法及相关色谱柱产品进行了梳理,以供参考。
本文内容涵盖样品分析案例、产品使用指南等,欢迎查阅!
应用案例 | 体积排阻色谱
案例1. Zenix-C SEC-80色谱柱分析丝素肽样品分子大小变异体
Column: Zenix-C SEC-80 (3 µm, 80 Å, 7.8×300 mm)
Mobile phase: 100 mM PB+100 mM Na2SO4
Flow rate: 0.5 mL/min
Detector: UV 280 nm
Column temperature: 25 °C
Injection volume: 10 µL
Sample: 丝素肽 (2 mg/mL)

图1. Zenix-C SEC-80分析丝素肽样品图谱
应用案例 | 离子交换色谱
案例2. Proteomix SAX色谱柱分析短肽样品电荷异质体
Column: Proteomix SAX-NP5 (5 µm, 4.6×150 mm)
Mobile phase:A: 20 mM Tris, pH 9.0
B: 20 mM Tris+0.5 M NaCl, pH 9.0
Flow rate: 1.0 mL/min
Detector: UV 214 nm
Column temperature: 25 °C
Injection volume: 20 µL
Sample: 短肽 (pI 7.0)

图2. Proteomix SAX-NP5P分析短肽样品图谱
案例3. Proteomix SAX色谱柱分析多肽样品
Column: Proteomix SAX-NP5 (5 µm, 4.6×150 mm)
Mobile phase:A: 20 mM 三乙醇胺+20 mM Bis-Tris-Propane+20 mM N-甲基哌嗪, pH 9.7
B: 20 mM 三乙醇胺+20 mM Bis-Tris Propane+20 mM N-甲基哌嗪, pH 3.7
Flow rate: 0.5 mL/min
Detector: UV 280 nm
Column temperature: 25 °C
Injection volume: 20 µL
Sample: 多肽 (2 mg/mL)

图3. Proteomix SAX-NP5P分析多肽样品图谱
应用案例 | 反相作用色谱
案例4. GP-C18色谱柱分析比伐芦定样品含量
Column: GP-C18 (5 µm, 120 Å, 4.6×250 mm)
Mobile phase: A: 0.1 M NaAc: H2O=1: 1
B: 0.1 M NaAc: ACN=1: 1
Flow rate: 1.2 mL/min
Detector: UV 215 nm
Column temperature: 40 °C
Injection volume: 40 µL
Sample: 比伐芦定对照品 (0.25 mg/mL)

图4. GP-C18分析比伐芦定样品图谱
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