新冠病毒（SARS-CoV-2）逐渐出现更多的变异株，对人们的生命安全带来威胁，全球范围内都迫切需要能提供更有效和广谱保护的疫苗以克制新冠疫情的蔓延。

　　赛分科技客户北京大学魏文胜课题组在国际顶尖杂志《Cell》发表题为《Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants》文章*，文中报道了circRNA疫苗技术平台，并以此开发了针对新冠病毒及其系列变异株的cricRNA疫苗，可有效中和Omicron、Delta等变异株。该项研究中采用赛分科技体积排阻色谱SRT SEC-2000制备circRNA，可以得到高纯度的环状RNA疫苗（circRNARBD-Delta）对多种新冠病毒变异株具有广谱保护力。

背景介绍

　　目前，新冠疫情防控不能有丝毫松懈，而疫苗是有效应对病毒传染的措施。现有新冠病毒疫苗一定程度上可以预防新冠病毒入侵，但效果仍有些差强人意，尽管最近有报道称，在接受两剂疫苗接种后，用原疫苗进行额外的接种可以增强防护效果、可以部分提高中和能力，但对于Omicron变异类型的病毒的中和能力比野生型的低4~13倍。这对目前的疫苗疗效提出了严峻的挑战，突出了开发针对这种快速传播变种的有效疫苗的迫切性。

文章概述

　　文章报告了一种环状RNA（circRNA）疫苗，它通过表达刺突蛋白的三聚体受体结合域（Receptor Binding Domain，RBD），引起有效的中和抗体和T细胞反应，对小鼠和恒河猴对抗SARS-CoV-2提供强有力的保护。且对比于1mΨ修饰的mRNA疫苗，circRNA疫苗能够产生更多、更持久的抗原，并引起更高比例的中和抗体和明显的Thl倾斜的免疫反应。其中circRNARBD-Delta对多种新冠病毒变异株具有广谱保护力，使其成为对抗SARS-CoV-2目前关注的变体（VOCs）的有利选择。

　　文章介绍的一种高纯度circRNA疫苗制备方法，采用赛分科技SRT SEC-2000（5μm， 2000Å，4.6×300mm）色谱柱富集circRNA样品，分五段采集（图1），用凝胶电泳检测收集样品（图2），circRNA实现很好的富集。收集富含circRNA的馏分，然后再进行柱纯化（图3），将纯化前后的样品再次进行凝胶电泳分析（图4），得到高纯度样品，可用于后续药效实验等操作。

图1 circRNARBD分析色谱图

图2 馏分（图1）收集凝胶电泳图

图3 柱纯化图谱

图4 柱纯化后凝胶电泳图

　　赛分科技SEC色谱柱已被证实可以很好地应用在环状mRNA项目，本中采用的SRT SEC色谱柱用于制备高纯度circRNA具有良好效果，在之前的文献速递栏目中，介绍赛分科技客户苏州科锐迈德在bioRxiv平台上发表了用于癌症治疗的环状mRNA应用研究成果，其中介绍使用SRT SEC-1000制备柱用于纯化circRNA得到高纯度的样品。

　　此外，MIT Daniel Anderson教授实验室发表在《Molecular Cell》杂志发表的文章同样采用赛分科技 SRT SEC-2000这款色谱柱实现circRNA的纯化。

　　[1] Liang Qu, Zongyi Yi, Yong Shen, et. Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants, Cell (2022),doi: https://doi.org/10.1016/j.cell.2022.03.044.

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