Agarosix MC90 IMAC填料是金属亲和层析填料,适用于纯化组氨酸(His)标签的重组蛋白,这类重组蛋白广泛应用于生物技术领域。该填料以琼脂糖为基质,粒径为90 μm, Agarosix MC90-Ni Excel为TED类型的Ni亲和层析填料,不用重复上Ni; Agarosix MC90-NTA Ni为NTA类型亲和填料,具有更高载量。琼脂糖基质的亲和层析填料具有良好的生物相容性,避免了与生物类样品的非特异性吸附。琼脂糖表面专有连接物链接了能螯合多价金属离子的羧酸基团。
介质特性:
填料类型 | Agarosix MC90-NTA Ni | Agarosix MC90-Ni Excel |
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基质 | 高交联6%琼脂糖 | 高交联6%琼脂糖 |
粒径 | 90 μm | 90 μm |
pH 稳定性(操作) pH稳定性(CIP) |
3~12 2~14 |
2~12 2~14 |
螯合比例 | 4 : 2 | 5 : 1 |
His-tag Protein载量 | ≥ 50 mg/mL | ≥ 35 mg/mL |
操作温度 | 2~40℃ | 2~40℃ |
操作压力 | 1100 cm/hr,柱高:200 mm, 压力 1.5 bar(0.5 M NaCl) | |
流动相兼容性 | 水溶液,或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物、常用缓冲液 | 耐受100mM EDTA(2h)、10mM EDTA(24h)、10mM DTT |
Ni补充频率 | Ni易脱落,一般3-5次需重新补Ni | 不用重复上Ni |
清洗(CIP) | 0.1 M NaOH | 0.5 M NaOH |
再生条件 | 含0.1-1 M咪唑的缓冲溶液 | |
储存 | 4-35°C,50% (v/v) ,保存于20%乙醇中 |
常规线速度下(200-400cm/h),在几种常见流动相中填料压力表现良好,低于1 bar;建议装柱高度20-25 cm。
Column:Agarosix MC90-Ni Excel、竞品Ni Excel
Mobile Phase: A: 50mM PB,500mM NaCl,pH8.0; B: 25M PB,500mM 咪性,pH8.0
测试样品:His-tag Protein
在100 mM EDTA条件下泡碱1 h, Agarosix MC90-Ni Excel DBC下降至67.98%,竞品Ni Excel下降至42.06%;
在EDTA耐受性方面,Agarosix MC90-Ni Excel具有更高的耐受性。
耐碱测试实验条件
泡碱浓度:1 M NaOH溶液
Column:Agarosix MC90-Ni Excel、竞品Ni Excel
泡碱测试模拟填料寿命实验,一般CIP条件0.5 M碱洗5-6CV,约30min。泡碱48h相当于96次纯化实验CIP,Agarosix MC90-Ni Excel与竞品保持在初始载量的80%左右,整体耐碱性能与竞品相当。
产品名称 | 粒径 | 订货号 |
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Agarosix MC90-Ni Excel | 90 | 251590990 |
Agarosix MC90-CA Excel | 90 | 252390990 |
Agarosix MC90-NTA Ni | 90 | 251390990 |
Agarosix MC90-NTA CA | 90 | 252290990 |
预装柱规格为4.2 、5 mL,包装规格为1L、5 L 、10 L、50 L。