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  • Monomix 系列离子交换填料

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    • 高结合载量和极好的生物相容性
    • 刚性基质可耐受高压和高流速
    • 高分辨率、高柱效和高回收率
    • 易于放大
    • 高度亲水性表面,可忽略的非特异性吸附
    • 常规装柱条件下,体积变化小

      Monomix 系列离子交换填料专为生物样品的分离 纯化而设计。其以亲水性聚甲基丙烯酸酯为基质 , 粒径 有 15、30、 45 、 60 μm ,粒 径 分 布 更 均 一。其 中 Monomix MC 填料,为中等载量离子填料。 Monomix HC,为高载量离子填料,动态 载量大于 80 mg/mL。

      Monomix 系列离子交换填料表面经赛分科技特殊 处理,具有好的亲水性,最大程度地避免了与生物类样 品的非特异性吸附。通过专有的表面修饰技术,在亲水 性基质表面键合离子交换官能团,包括 : 强阳离子交换 ( SP&S )、 强 阴 离 子 交 换 ( Q )、弱 阴 离 子 交 换 (DEAE & MAX )配基作用基团,并确保了表面离子 交换层的高密度和均一性。

      Monomix 系列离子交换填料可广泛适用于抗体、疫苗、胰岛素、蛋白、核酸、肝素等生物样品的分离和纯化。

    表面化学组成

    图1. Monomix 系列SP与S阳离子介质的表面化学 组成示意图

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    图2. Monomix 系列Q、DEAE、MAX 阴离子交换介质的表面化学组成示意图

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    图3. Monomix MC30(粒径30μm)的电镜扫描图像。高度均一分散的介质具有很窄的颗粒分布(D90/D10<1.3)

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    图4. Monomix HC30(粒径30μm)的电镜扫描图像。

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    技术参数

    表1. Monomix HC/MC-CEX 技术参数

    填料类型 Monomix HC-SP Monomix MC-SP
    基质 亲水性聚甲基丙烯酸酯
    官能团 -SO3H -SO3H -SO3H -SO3H
    粒径大小 30μm 45μm 60μm 30μm
    动态载量*
    (/mL填料)
    ≥90 mg
    Lysozyme
    ≥85 mg
    Lysozyme
    ≥90 mg
    Lysozyme
    ≥40 mg
    Lysozyme
    最大线性流速 1000 cm/h 1000 cm/h 1000 cm/h 1000 cm/h
    操作温度 ≤40℃ ≤40℃ ≤40℃ ≤40℃
    pH适用范围 2-12 2-12 2-12 2-12
    操作压力 30 μm以上≤ 1 MPa(10 bar)
    流动相兼容性 适用于缓冲盐体系(Tris、磷酸盐、醋酸盐缓冲液等),常规有机相/水体系(乙腈、乙醇等)
    长期保存方法 50%(v/v),保存于20%乙醇中
    再生 1-2 M NaCI
    长期保存方法 50%(v/v),保存于20%乙醇中
    清洗 0.5 M HCI or 0.5-1.0 M NaOH,强疏水性结合的杂质可用0.1-1%的吐温或Triton X-100清洗

    表2. Monomix HC/-CEX 二代产品技术参数

    填料类型 Monomix HC45-S Monomix Mab60-SP
    基质 亲水性聚甲基丙烯酸酯 亲水性聚甲基丙烯酸酯
    官能团 -CH2-SO3H -SO3H
    粒径大小 45 μm 60 μm
    动态载量*(/mL填料) ≥ 90 mg Lysozyme ≥ 60 mg Lysozyme
    最大线性流速 1000 cm/h 1000 cm/h
    操作温度 ≤ 40℃ ≤ 40℃
    pH稳定性 (操作) 2-12 2-12
    pH稳定性 (CIP) 1-14 1-14
    操作压力 ≤ 1 MPa(10 bar) ≤ 1 MPa(10 bar)
    流动相兼容性 适用于缓冲盐体系(Tris、磷酸盐、醋酸盐缓冲液等),常规有机相/水体系(乙腈、乙醇等)
    长期保存方法 50%(v/v),保存于20%乙醇中
    再生 1-2 M NaCI
    清洗 0.5 M HCI或0.5-1.0 M NaOH,强疏水性结合的杂质可用0.1-1%的吐温或Triton X-100清洗

    表3. Monomix HC-AEX 二代产品技术参数

    填料类型 Monomix Mab60-Q Monomix HC60-DEAE Excel
    基质 亲水性聚甲基丙烯酸酯 亲水性聚甲基丙烯酸酯
    官能团 -N+(CH3)3 -N(CH2CH3)2
    粒径大小 60 μm 60 μm
    动态载量*
    (/mL填料)
    ≥ 80 mg BSA ≥ 80 mg BSA
    最大线性流速 1000 cm/h 1000 cm/h
    操作温度 ≤ 40℃ ≤ 40℃
    pH稳定性(操作) 2-13 2-13
    pH稳定性(CIP) 1-14 1-14
    操作压力 ≤ 1 MPa(10 bar) ≤ 1 MPa(10 bar)
    流动相兼容性 适用于缓冲盐体系(Tris、磷酸盐、醋酸盐缓冲液等),常规有机相/水体系(乙腈、乙醇等)
    长期保存方法 50%(v/v),保存于20%乙醇中
    再生 1-2 M NaCI
    清洗 0.5 M HCI或0.5-1.0 M NaOH,强疏水性结合的杂质可用0.1-1%的吐温或Triton X-100清洗

      动态载量(Dynamic Binding Capacity)测试方法:

      Monomix HC/MC-SP:线性流速为360 cm/h,上样液为含1mg/mL溶菌酶的50 mM磷酸盐缓冲液(pH=6.0)。

    高动态载量

      Monomix IEX层析介质以聚甲基丙烯酸酯微球为基质,在低驻留时间条件下仍然具有很高的动态结合载量。在实际使用过程中, 在同样的柱子尺寸和填料体积下,Monomix IEX可以缩减生物样品生产下游纯化的时间,提高生产效率;在同样的下游纯化的时间内,Monomix IEX可以装更长的柱子(填料体积大),可以批次处理更多的生物样品,从而提高生产效率。

    更快的操作流速

      相比于传统的琼脂糖基质,采用聚甲基丙烯酸酯基质可以提高填料的耐压性能,能够在更快的流速下实现样品纯化,(或者可以装更长的柱子,可以批次处理更多的生物样品)节省宝贵的时间,提高生产效率。对于不稳定的生物样品(要求快速分离纯化母液),在提高生产效率的同时可以同时提高产品的收率和质量控制。

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    图5. Monomix IEX填料背压与流速的线性关系
    Monomix Mab60-SP

    流动相:50 mM NaAc,100 mM NaCl

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    Monomix Mab60-Q

    流动相: 50 mM Tris

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    Monomix HC60-DEAE Excel

    流动相: 50 mM Tris

    超高的耐碱性能

      Monomix IEX 填料可在 pH2-12 之间正常使用,对在线清洗的 1.0 M NaO H 也显示出良好的耐碱性。如图 6 所示,以 1200 个柱体积的 1.0 M NaOH 进行在线清洗,溶菌酶 (Lysozyme) 保留时间的变化可以忽略不计。

    3.jpg

    图6. Monomix IEX填料耐1.0 M NaOH CIP性能

    填料: Monomix HC30-SP (30 μm, 1000 Å )

    样品: 溶菌酶(Lysozyme)(1 mg/mL)

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    图7. Monomix HC60-SP 填料耐0.5 M NaOH QC性能

    填料: Monomix HC60-SP (60 μm, 1000 Å)

    样品: 核糖核酸酶A&细胞色素C&溶菌酶(5 mg/mL)

    如图7所示,0.5 M NaOH碱泡408 h后,QC保留时间RSD%在2.0%以内。

    3.jpg

    图8. Monomix HC60-SP 填料耐0.5 M NaOH性能

    填料: Monomix HC60-SP (60 μm, 1000 Å)

    0.5 M NaOH碱泡408h后,电镜观察到的填料球形形状及孔结构完整。

    3.jpg

    图9. Monomix HC60-SP 填料耐1 M NaOH CIP性能(DBC)

    填料: Monomix HC60-SP (60 μm, 1000 Å)

    样品: 溶菌酶(Lysozyme)

    1 M NaOH CIP 100次DBC基本不变,测试结果RSD%为3.3%。

    3.jpg

    图10. Monomix HC60-SP 填料耐1 M NaOH CIP性能(QC)

    填料: Monomix HC60-SP (60 μm, 1000 Å)

    样品: 核糖核酸酶A&细胞色素C&溶菌酶(5 mg/mL)

    1 M NaOH CIP100次后QC保留时间基本不变,RSD%在1.0%以内。

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    图11. Monomix Mab60-SP 抗体DBC测试

    填料: Column: Monomix Mab60-SP (10×200 mm)

    样品: 单抗&双抗

    Monomix Mab60-SP 在该双抗项目上表现良好耐盐性

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    图12. Monomix Mab60-Q 填料耐1 M NaOH 泡碱

    填料: Monomix Mab60-Q (60 μm, 1000 Å)

    样品: 牛血清蛋白(BSA)(1 mg/mL)

    1M NaOH 溶液泡碱240 h后,DBC保持在初始值的80%以上

    可忽略的非特异性吸附

      Monomix IEX 表面含有多个亲水结构域,当用来进行生物分析时,能使其非特异性吸附最小化。如图13所示,Monomix Mab60-Q 对样品对样品 ( 溶菌酶和牛血清蛋白 ) 显示出最小的非特异性吸附。

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    图13. 在Monomix Mab60-Q层析连续进样 牛血清蛋白(BSA)样品18次

    填料: Monomix Mab60-Q (60 μm, 1000 Å)

    样品: 牛血清蛋白 (BSA)(0.5 mg/mL)

    应用图谱

    产品名称 官能团种类 粒径 订货号
    Monomix MC30-SP 强阳离子交换 45μm 280645950
    Monomix HC60-SP 强阳离子交换 60μm 280660950
    Monomix HC45-S 强阳离子交换 45μm 284545950
    Monomix Mab60-Q 强阴离子交换 60μm 285060950
    Monomix HC60-MAX 弱阴离子交换 284860950
    Monomix Mab60-SP 强阳离子交换 284760950
    Monomix HC60-DEAE Excel 弱阴离子交换 285160950

    包装规格为1L、5L、10L、50L,预装柱规格为4.2mL、5mL。

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