赛分科技TweenTrap 色谱柱是专为去除水性样品中的表面活性剂(例如吐温)而设计的。填料是由刚性、球形、高交联度、粒径为5 µm的PS/DVB制成。将专有的表面涂层共价键合到PS/DVB载体上,从而实现极高的稳定性及对目标化合物的最小非特异性结合。共价结合的两亲官能团能够吸附脂溶性和水溶性的去污剂(例如吐温)。色谱柱兼容于大多数水相缓冲液,比如醋酸盐、磷酸盐、Tris和其他。
TweenTrap 色谱柱可以与SEC色谱柱串联运行水性样品,并且专门设计用于收集和去除表面活性剂,比如干扰蛋白质SEC定量分析的聚山梨酯 80/20(吐温 80/吐温20)。为了获得最佳结果,建议TweenTrap运行水基流动相,不添加有机溶剂。
产品名称 | TweenTrap |
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填料 | 高度交联的PS/DVB树脂载体接枝有致密堆积的纳米级厚度两亲涂层 |
粒径 | 5 µm |
孔结构 | 无孔 |
pH稳定性 | 2-13 |
操作温度极限 | 80℃ |
操作压力极限 | 5000 psi(344bar) |
流动相兼容性 | 典型缓冲液:磷酸盐、Tris和乙酸盐。有机添加剂会洗掉Tween和其他表面活性剂 |
流速 | 色谱柱内径为4.6 mm时通常为0.1-1.0 mL/min |
吐温 80 浓度 | 进样体积 | #达到色谱柱容量之前的进样量 |
0.01% | 100 µL | 20 |
0.04% | 100 µL | 5 |
如图1和图2所示,赛分Tween Trap色谱柱在市售重组单克隆抗体(mAb)西妥昔单抗的二聚体与单体分布的谱图中能够最小化吐温的干扰。
色谱柱: TweenTrap
流动相: 150 mM Sodium phosphate, pH7.0
流速: 1 mL/min
柱温: 室温
检测波长: UV 214 nm
进样体积: 100 µL
样品: 如图所示
线 1 显示了单独西妥昔单抗的 SEC分析(不含吐温)。单体前面可以看见清晰的聚集峰。
线 2 显示了0.04% 吐温80中西妥昔单抗的SEC分析(未串联TweenTrap色谱柱)。根据只含吐温80的色谱图(线 3 ),聚集峰的左边肩前应该是吐温80。这表明吐温80可能会干扰西妥昔单抗的定量分析。
线 5显示了吐温80干扰最小化的曲线,这是由于串联了赛分TweenTrap色谱柱。以同样的色谱柱条件再运行一遍仅含西妥昔单抗、不含吐温80的样品,进一步证明了这一点 (线 4)。
因此,图1和图2中的色谱叠加图有助于证明西妥昔单抗样品中吐温80是如何被截留在赛分TweenTrap色谱柱上,同时仍然可以有效的分辨和积分聚集峰。可以看到西妥昔单抗聚集体在所有线上的峰型略有不同,这可能归因于TweenTrap色谱柱上西妥昔单抗聚集体的相互作用,或者是因为增加了色谱柱死体积,用户可能需要对这种效果采取预防措施。
产品名称 | 内径*长度 | 订货号 |
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TweenTrap | 4.6×35mm | 010054-4603 |